L’annexe du règlement (UE) no 231/2012 est modifiée comme suit:
1) Dans l’entrée relative à l’additif E 960 Glycosides de stéviol, l’intitulé est remplacé par le texte suivant:
«E 960a GLYCOSIDES DE STÉVIOL ISSUS DE STEVIA».
2) La mention suivante est insérée après la mention relative à l’additif E 960:
«E 960c (i) RÉBAUDIOSIDE M PRODUIT PAR MODIFICATION ENZYMATIQUE DES GLYCOSIDES DE STÉVIOL ISSUS DE STEVIA
| Synonymes |
| Définition |
Le rébaudioside M est un glycoside de stéviol composé principalement de rébaudioside M, d’autres glycosides de stéviol tels que le rébaudioside A, le rébaudioside B, le rébaudioside D, le rébaudioside I et le stévioside pouvant être présents en faibles quantités.
Le rébaudioside M est obtenu par bioconversion enzymatique de glycosides de stéviol purifiés (95 % de glycosides de stéviol) extraits de feuilles de la plante Stevia rebaudiana Bertoni, à l’aide d’UDP-glycosyl-transférase et de saccharose synthase produites par les levures génétiquement modifiées K. phaffii (anciennement Pichia pastoris) UGT-a et K. phaffi UGT-b qui facilitent la transformation du glucose du saccharose et de l’UDP-glucose en glycosides de stéviol par des liaisons glycosidiques.
Après élimination des enzymes par séparation solide/liquide et traitement thermique, la purification comprend une concentration du rébaudioside M par adsorption de résine, puis une recristallisation du rébaudioside M pour obtenir un produit final contenant au moins 95 % de rébaudioside M. Les cellules viables des levures K. phaffii UGT-a et K. phaffii UGT-b ou leur ADN ne peuvent pas être détectées dans l’additif alimentaire.
| Nom chimique | Rébaudioside M: ester 2-O-β-D-glucopyranosyl-3-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosylique d’acide 13-[(2-O-β-D-glucopyranosyl-3-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosyl)oxy]kaur-16-én-18-oïque
| Formule moléculaire | Nom commun | Formule | Facteur de conversion
| Rébaudioside M | C56 H90 O33 | 0,25
| Poids moléculaire et numéro CAS | Nom commun | Numéro CAS | Poids moléculaire (g/mol)
| | |
| Rébaudioside M | 1220616-44-3 | 1291,29
| Dosage | Pas moins de 95 % de rébaudioside M sur la base de la matière sèche.
| Description | Poudre blanche à jaune clair ayant un pouvoir sucrant environ 200 à 350 fois supérieur à celui du saccharose (à raison d’une teneur en équivalent saccharose de 5 %)
| Identification
| Solubilité | Légèrement à facilement soluble dans l’eau
| pH | Entre 4,5 et 7,0 (solution à 1:100)
| Pureté
| Cendres totales | Pas plus de 1 %
| Perte à la dessiccation | Pas plus de 6 % (105 °C, 2 heures)
| Solvant résiduel: | Pas plus de 5 000 mg/kg d’éthanol
| Arsenic | Pas plus de 0,015 mg/kg
| Plomb | Pas plus de 0,2 mg/kg
| Cadmium | Pas plus de 0,015 mg/kg
| Mercure | Pas plus de 0,07 mg/kg
| Protéines résiduelles | Pas plus de 5 mg/kg
| Taille des particules | Pas moins de 74 μm [utilisation d’un tamis de 200 mesh pour une taille maximale des particules de 74 μm]»