Champ d’application
1. La présente annexe s’applique aux dispositifs destinés à la détection ou à la quantification des marqueurs d’infection par le virus de l’immunodéficience humaine (VIH).
Le tableau 1 s’applique aux tests de première ligne pour les anticorps VIH 1/2 (anti-VIH 1 et 2) et aux tests de première ligne combinés antigènes et anticorps pour VIH 1/2 (Ag/Ac VIH 1 et 2) qui ne sont pas des tests rapides.
Le tableau 2 s’applique aux tests de première ligne pour anti-VIH 1 et 2 et Ag/Ac VIH 1 et 2 qui sont des tests rapides.
Le tableau 3 s’applique aux tests de confirmation pour anti-VIH 1 et 2.
Le tableau 4 s’applique aux tests antigéniques pour VIH 1 et Ag/Ac VIH.
Le tableau 5 s’applique aux dispositifs NAT qualitatifs et quantitatifs pour l’acide ribonucléique (ARN) du VIH.
Le tableau 6 s’applique aux autotests VIH 1/2.
Définitions
2. Aux fins de la présente annexe, on entend par:
1) «échantillons de séroconversion du VIH», les échantillons:
— antigène p24 positifs et/ou ARN-VIH positifs,
— qui ont été identifiés par les tests de première ligne de dépistage des anticorps, et
— qui ont obtenu un résultat indéterminé ou positif lors des tests de confirmation;
2) «échantillons de séroconversion du VIH», les échantillons:
— antigène p24 positifs et/ou ARN-VIH positifs,
— qui n’ont pas été identifiés par les tests de première ligne de dépistage des anticorps, et
— qui ont obtenu un résultat indéterminé ou négatif lors des tests de confirmation.
Tableau 1. Tests de première ligne: anti-VIH 1 et 2, Ag/Ac VIH 1 et 2 (exigences pour la détection des anticorps)
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 400 VIH 1
≥ 100 VIH 2
Y compris 40 sous-types non-B;
y compris 25 échantillons positifs de sérum frais «du jour même» (≤ 1 jour après le prélèvement)
Tous les sous-types de VIH 1 disponibles doivent être représentés par au moins 3 échantillons par sous-type
| Tous les échantillons vrais positifs doivent être identifiés comme positifs
| | Panels de séroconversion |
≥ 30 panels
Au moins 40 échantillons de séroconversion précoce au VIH doivent être testés
|
La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique
Tous les échantillons de séroconversion au VIH doivent être identifiés comme positifs
| Spécificité diagnostique | Donneurs de sang non sélectionnés (y compris donneurs effectuant leur premier don) | ≥ 5 000 | ≥ 99,5 %
| Patients hospitalisés | ≥ 200 | Les limitations potentielles quant à la spécificité doivent être identifiées le cas échéant
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle |
≥ 100 au total
(notamment FR+, d’infections par des virus apparentés, de femmes enceintes, de personnes récemment vaccinées contre un quelconque agent infectieux)
Tableau 2. Tests rapides: anti-VIH 1 et 2, Ag/Ac VIH 1 et 2 (exigences pour la détection des anticorps)
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 400 VIH 1
≥ 100 VIH 2
Y compris 40 sous-types non-B;
Tous les sous-types de VIH 1 disponibles doivent être représentés par au moins 3 échantillons par sous-type
| Tous les échantillons vrais positifs doivent être identifiés comme positifs
| Panels de séroconversion |
≥ 30 panels
Au moins 40 échantillons de séroconversion précoce au VIH doivent être testés
|
La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique
Tous les échantillons de séroconversion au VIH doivent être identifiés comme positifs
| Spécificité diagnostique | Donneurs de sang non sélectionnés (y compris donneurs effectuant leur premier don) | ≥ 1 000 | ≥ 99 %
| Patients hospitalisés | ≥ 200 | Les limitations potentielles quant à la spécificité doivent être identifiées le cas échéant
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle |
≥ 200 échantillons de femmes enceintes
≥ 100 autres échantillons avec réaction croisée potentielle au total (par exemple, FR+, d’infections apparentées)
Tableau 3. Tests de confirmation: anti-VIH 1/2
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 200 VIH 1
≥ 100 VIH 2
Comprenant des échantillons représentant différents stades de l’infection et différents profils d’anticorps
| Identification comme «positif confirmé» ou «indéterminé» et non comme «négatif»
| Panels de séroconversion |
≥ 15 panels de séroconversion/panels à faible titre
≥40 échantillons de séroconversion précoce au VIH
|
La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique
Tous les échantillons de séroconversion au VIH doivent être identifiés comme positifs
| Spécificité diagnostique | Donneurs de sang | ≥ 200 | Pas de résultats faussement positifs/pas de neutralisation
| Patients hospitalisés | ≥ 200
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle | ≥ 50 au total (y compris des échantillons de femmes enceintes, des échantillons ayant donné des résultats indéterminés dans d’autres tests de confirmation)
Tableau 4. Tests antigéniques: VIH 1, Ag/Ac VIH (exigences pour la détection des antigènes)
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 50 positifs à l’antigène du VIH-1
≥ 50 surnageants de culture cellulaire comprenant différents sous-types du VIH-1 et le VIH-2
| Tous les échantillons vrais positifs doivent être identifiés comme positifs (après neutralisation, le cas échéant)
| Panels de séroconversion |
≥ 20 panels de séroconversion/panels à faible titre
≥40 échantillons de séroconversion précoce au VIH
|
La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique
Tous les échantillons de séroconversion au VIH doivent être identifiés comme positifs
| Sensibilité analytique | Premier réactif de référence international, antigène p24 du VIH-1, code NIBSC: 90/636 | | ≤ 2 UI/ml
| Spécificité diagnostique | Donneurs de sang | ≥ 200 | ≥ 99,5 % après neutralisation ou, si aucun test de neutralisation n’est disponible, après résolution du statut de l’échantillon
| Patients hospitalisés | ≥ 200 | Les limitations potentielles quant à la spécificité doivent être identifiées le cas échéant
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle | ≥ 50
Tableau 5. Dispositifs NAT qualitatifs et quantitatifs pour ARN-VIH
1. En ce qui concerne les dispositifs d’amplification d’une séquence cible, un contrôle de fonctionnalité pour chaque échantillon (contrôle interne) représente l’état de la technique. Ce contrôle est opéré si possible tout au long du processus: extraction, amplification/hybridation, détection.
2. La détection du génotype et/ou du sous-type doit être démontrée par une validation appropriée de la conception de l’amorce ou de la sonde et doit aussi être validée en testant des échantillons de génotypes caractérisés.
3. La réaction croisée potentielle de séquences d’un acide nucléique non cible doit être analysée par une validation appropriée de la conception de l’amorce ou de la sonde et doit aussi être validée en testant des échantillons sélectionnés.
4. Les résultats des dispositifs NAT quantitatifs doivent suivre les normes internationales ou les matériaux de référence étalonnés, en fonction des disponibilités, et sont exprimés en unités internationales utilisées dans le domaine d’application en question.
5. Les dispositifs NAT qualitatifs pour le VIH destinés à être utilisés pour détecter la présence du VIH dans le sang, les composants sanguins, les cellules, les tissus ou les organes, ou leurs dérivés, afin d’évaluer s’ils sont appropriés à la transfusion, à la transplantation ou à l’administration de cellules, doivent être conçus de manière à détecter aussi bien le VIH-1 que le VIH-2.
6. Les dispositifs NAT qualitatifs pour le VIH autres que les tests de typage du virus doivent être conçus de manière à ce que le risque d’échec d’une région ciblée par les NAT pour le VIH-1 soit pris en considération, par exemple en ciblant deux régions indépendantes.
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité analytique | Standard international de l’OMS concernant l’ARN-VIH 1; standard international de l’OMS concernant l’ARN-VIH 2; ou matériaux de référence étalonnés |
La sensibilité et la limite de détection des tests NAT doivent être validées par des séries de dilution de matériaux de référence, en testant les réplicats (au minimum 24) à différentes concentrations d’analyte, y compris celles avec une transition de résultats positifs à des résultats négatifs avec le dispositif NAT en question.
La limite de détection doit être exprimée en tant que valeur limite positive à 95 % (IU/ml) après des analyses statistiques (par exemple, des analyses de probabilité).
NAT quantitatif: définition de limite de quantification inférieure et supérieure, fidélité, exactitude,
champ de mesure «linéaire», «champ dynamique».
Reproductibilité aux différents niveaux de concentration.
| Conformément à l’état de la technique
| Sensibilité du génotype/sous-type de VIH |
Tous les génotypes/sous-types en question, de préférence de matériaux de référence internationaux
Substituts potentiels pour sous-types rares de VIH (à quantifier par des méthodes appropriées): surnageants de culture cellulaire; transcrits in vitro; plasmides.
|
NAT qualitatif: au moins 10 échantillons par génotype ou sous-type
NAT quantitatif: séries de dilution pour démontrer l’efficacité de la quantification
| Conformément à l’état de la technique
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs reflétant les conditions de routine des utilisateurs (par exemple, pas de présélection des échantillons) |
NAT quantitatif: ≥ 100
Des résultats comparatifs avec un autre système NAT doivent être établis en parallèle.
| Conformément à l’état de la technique
| Panels de séroconversion |
NAT qualitatif: ≥ 10 panels
Des résultats comparatifs avec un autre système NAT doivent être établis en parallèle.
| Conformément à l’état de la technique
| Spécificité diagnostique | Échantillons de donneurs de sang |
NAT qualitatif: ≥ 500
NAT quantitatif: ≥ 100
| Conformément à l’état de la technique
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle | ≥ 10 échantillons positifs pour un rétrovirus humain (exemple: HTLV) | Conformément à l’état de la technique
| Effets reportés |
Fortement positifs à l’ARN-VIH;
négatifs à l’ARN-VIH
| Au moins cinq séries doivent être réalisées lors des études de robustesse, en alternant des échantillons fortement positifs et négatifs. Les titres viraux des échantillons fortement positifs doivent être représentatifs des titres viraux élevés apparaissant naturellement. | Conformément à l’état de la technique
| Détection en lien avec le statut immunologique | Positifs à l’ARN-VIH: négatifs aux anti-VIH, positifs aux anti-VIH | Échantillons de préséroconversion (négatifs aux anti-VIH) et de post-séroconversion (positifs aux anti-VIH) | Conformément à l’état de la technique
| Taux d’échec global | Faiblement positifs à l’ARN-VIH | ≥ 100 échantillons faiblement positifs à l’ARN-VIH doivent être testés. Ceux-ci doivent contenir une concentration en virus équivalente à trois fois la concentration en virus limite positive à 95 %. | ≥ 99 % positifs
Tableau 6. Exigences supplémentaires applicables aux autotests VIH-1/2
| Caractéristique de performance | Échantillons | Nombre de profanes
| Interprétation des résultats |
Interprétation des résultats par des profanes reflétant le champ de niveaux de réactivité suivant:
— non réactifs
— réactifs
— faiblement réactifs
— non valables
| ≥ 100
| Sensibilité diagnostique | Personnes profanes dont on sait qu’elles sont positives | ≥ 200
| Spécificité diagnostique | Personnes profanes qui ignorent leur statut | ≥ 400
| Personnes profanes qui ont un risque élevé d’avoir contracté l’infection | ≥ 200