Champ d’application
La présente annexe s’applique aux dispositifs destinés à la détection ou à la quantification des marqueurs d’infection par le virus de leucémie humaine à cellules T (HTLV).
Le tableau 1 s’applique aux tests de première ligne pour les anticorps dirigés contre HTLV I ou II (anti-HTLV I/II) qui ne sont pas des tests rapides.
Le tableau 2 s’applique aux tests de première ligne pour anti-HTLV I/II qui sont des tests rapides.
Le tableau 3 s’applique aux tests de confirmation pour anti-HTLV I/II.
Le tableau 4 s’applique aux dispositifs NAT pour HTLV I/II.
Tableau 1. Tests de première ligne: anti-HTLV I/II
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
|
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 300 HTLV-I
≥ 100 HTLV-II
y compris 25 échantillons positifs de sérum frais «du jour même» (≤ 1 jour après le prélèvement)
| Tous les échantillons vrais positifs doivent être identifiés comme positifs
| Panels de séroconversion | À définir en fonction des disponibilités | La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique, le cas échéant.
| Spécificité diagnostique | Donneurs de sang non sélectionnés (y compris donneurs effectuant leur premier don) | ≥ 5 000 | ≥ 99,5 %
| Patients hospitalisés | ≥ 200 | Les limitations potentielles quant à la spécificité doivent être identifiées le cas échéant
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle |
≥ 100 au total
(par exemple, RF+, d’infections virales apparentées, de femmes enceintes)
Tableau 2. Tests rapides: anti-HTLV I/II
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 300 HTLV-I
≥ 100 HTLV-II
| Tous les échantillons vrais positifs doivent être identifiés comme positifs
| Panels de séroconversion | À définir en fonction des disponibilités | La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique, le cas échéant.
| Spécificité diagnostique | Donneurs de sang non sélectionnés (y compris donneurs effectuant leur premier don) | ≥ 1 000 | ≥ 99 %
| Patients hospitalisés | ≥ 200 | Les limitations potentielles quant à la spécificité doivent être identifiées le cas échéant
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle |
≥ 200 échantillons de femmes enceintes
≥ 100 autres échantillons avec réaction croisée potentielle au total (par exemple, FR+, d’infections apparentées)
Tableau 3. Tests de confirmation: anti-HTLV I/II
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 200 HTLV-I
≥ 100 HTLV II
| Identification comme «positif confirmé» ou «indéterminé» et non comme «négatif»
| Panels de séroconversion | À définir en fonction des disponibilités | La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique, le cas échéant.
| Spécificité diagnostique | Donneurs de sang | ≥ 200 | Pas de résultats faussement positifs
| Patients hospitalisés | ≥ 200
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle | ≥ 50 au total (y compris des échantillons de femmes enceintes, des échantillons ayant donné des résultats indéterminés dans d’autres tests de confirmation)
Tableau 4. Dispositifs NAT pour HTLV I/II
1. En ce qui concerne les dispositifs d’amplification d’une séquence cible, un contrôle de fonctionnalité pour chaque échantillon (contrôle interne) représente l’état de la technique. Ce contrôle est opéré si possible tout au long du processus: extraction, amplification/hybridation, détection.
2. La détection du génotype et/ou du sous-type doit être démontrée par une validation appropriée de la conception de l’amorce ou de la sonde et doit aussi être validée en testant des échantillons de génotypes caractérisés.
3. La réaction croisée potentielle de séquences d’un acide nucléique non cible doit être analysée par une validation appropriée de la conception de l’amorce ou de la sonde et doit aussi être validée en testant des échantillons sélectionnés.
4. Les résultats des dispositifs NAT quantitatifs doivent suivre les normes internationales ou les matériaux de référence étalonnés, en fonction des disponibilités, et sont exprimés en unités internationales utilisées dans le domaine d’application en question.
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité analytique | Préparations de référence internationales |
La sensibilité et la limite de détection des tests NAT doivent être validées par des séries de dilution de matériaux de référence, en testant les réplicats (au minimum 24) à différentes concentrations d’analyte, y compris celles avec une transition de résultats positifs à des résultats négatifs avec le dispositif NAT en question.
La limite de détection doit être exprimée en tant que valeur limite positive à 95 % (IU/ml) après des analyses statistiques (par exemple, des analyses de probabilité).
NAT quantitatif: définition de limite de quantification inférieure et supérieure, fidélité, exactitude,
champ de mesure «linéaire», «champ dynamique».
Reproductibilité aux différents niveaux de concentration.
| Conformément à l’état de la technique
| Sensibilité des génotypes HTLV I et HTLV II |
Tous les génotypes en question, de préférence de matériaux de référence internationaux.
Substituts potentiels pour génotypes rares de HTLV (à quantifier par des méthodes appropriées): surnageants de culture cellulaire; transcrits in vitro; plasmides.
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NAT qualitatif: au moins 10 échantillons par génotype ou sous-type
NAT quantitatif: séries de dilution pour démontrer l’efficacité de la quantification
| Conformément à l’état de la technique
| Spécificité diagnostique | Échantillons de donneurs de sang |
NAT qualitatif: ≥ 500
NAT quantitatif: ≥ 100
| Conformément à l’état de la technique
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle | ≥ 10 échantillons positifs pour un rétrovirus humain (exemple: VIH-1, VIH-2) | Conformément à l’état de la technique
| Effets reportés |
Fortement positifs à l’ARN-HTLV;
négatifs à l’ARN-HTLV
| Au moins cinq séries doivent être réalisées lors des études de robustesse, en alternant des échantillons fortement positifs et négatifs. Les titres viraux des échantillons fortement positifs doivent être représentatifs des titres viraux élevés apparaissant naturellement. | Conformément à l’état de la technique
| Détection en lien avec le statut immunologique | Positifs à l’ARN-HTLV: négatifs aux anti-HTLV, positifs aux anti-HTLV | Échantillons de préséroconversion (négatifs aux anti-HTLV) et de post-séroconversion (positifs aux anti-HTLV) | Conformément à l’état de la technique
| Taux d’échec global | Faiblement positifs à l’ARN-HTLV | ≥ 100 échantillons faiblement positifs à l’ARN-HTLV doivent être testés. Ceux-ci doivent contenir une concentration en virus équivalente à trois fois la concentration en virus limite positive à 95 %. | ≥ 99 % positifs