Champ d’application
La présente annexe s’applique aux dispositifs destinés à la détection ou à la quantification des marqueurs d’infection par le virus de l’hépatite C (VHC).
Le tableau 1 s’applique aux tests de première ligne pour les anticorps dirigés contre le VHC (anti-VHC) et aux tests combinés antigènes et anticorps pour VHC (Ag/Ac VHC) qui ne sont pas des tests rapides.
Le tableau 2 s’applique aux tests de première ligne pour anti-VHC et Ag/Ac VHC qui sont des tests rapides.
Le tableau 3 s’applique aux tests de confirmation et aux tests complémentaires pour anti-VHC.
Le tableau 4 s’applique aux tests antigéniques VHC et Ag/Ac VHC.
Le tableau 5 s’applique aux dispositifs NAT qualitatifs et quantitatifs pour l’ARN du VHC.
Le tableau 6 s’applique aux autotests VHC.
Tableau 1. Tests de première ligne: anti-VHC, Ag/Ac VHC (exigences pour la détection des anticorps)
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 400
comprenant des échantillons représentant différents stades de l’infection et différents profils d’anticorps
Génotypes 1-4 du VHC: > 20 échantillons par génotype (y compris sous-types non-A du génotype 4); Génotypes 5 et 6 du VHC: > 5 échantillons chacun;
y compris 25 échantillons positifs de sérum frais «du jour même» (≤ 1 jour après le prélèvement)
| Tous les échantillons vrais positifs doivent être identifiés comme positifs
| | Panels de séroconversion |
≥ 30 panels
Les panels de séroconversion du VHC destinés à l’évaluation des tests combinés antigènes et anticorps du VHC (Ag/Ac VHC) doivent commencer par un ou plusieurs tests sanguins négatifs et comporter des membres relevant d’une infection précoce par le VHC (positifs à l’antigène de capside du VHC et/ou à l’ARN du VHC mais négatifs aux anti-VHC).
|
La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique
Les tests Ag/Ac VHC doivent démontrer une amélioration de la sensibilité à l’infection précoce par le VHC par rapport aux tests portant uniquement sur les anticorps dirigés contre le VHC.
| Spécificité diagnostique | Donneurs de sang non sélectionnés (y compris donneurs effectuant leur premier don) | ≥ 5 000 | ≥ 99,5 %
| Patients hospitalisés | ≥ 200 | Les limitations potentielles quant à la spécificité doivent être identifiées le cas échéant
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle |
≥ 100 au total
(par exemple, RF+, d’infections virales apparentées, de femmes enceintes)
Tableau 2. Tests rapides: anti-VHC, Ag/Ac VHC (exigences pour la détection des anticorps)
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 400
comprenant des échantillons représentant différents stades de l’infection et différents profils d’anticorps.
Génotypes 1-4 du VHC: > 20 échantillons par génotype (y compris sous-types non-A du génotype 4); Génotypes 5 et 6 du VHC: > 5 échantillons chacun;
| Tous les échantillons vrais positifs doivent être identifiés comme positifs
| Panels de séroconversion |
≥ 30 panels
Les panels de séroconversion du VHC destinés à l’évaluation des tests combinés antigènes et anticorps du VHC (Ag/Ac VHC) doivent commencer par un ou plusieurs tests sanguins négatifs et comporter des membres relevant d’une infection précoce par le VHC (positifs à l’antigène de capside du VHC et/ou à l’ARN du VHC mais négatifs aux anti-VHC).
|
La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique
Les tests Ag/Ac VHC doivent démontrer une amélioration de la sensibilité à l’infection précoce par le VHC par rapport aux tests portant uniquement sur les anticorps dirigés contre le VHC.
| Spécificité diagnostique | Donneurs de sang non sélectionnés (y compris donneurs effectuant leur premier don) 1 | ≥ 1 000 | ≥ 99 %
| Patients hospitalisés | ≥ 200 | Les limitations potentielles quant à la spécificité doivent être identifiées le cas échéant
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle |
≥ 200 échantillons de femmes enceintes
≥ 100 autres échantillons avec réaction croisée potentielle au total (par exemple, FR+, d’infections apparentées)
Tableau 3. Tests de confirmation et tests complémentaires: anti-VHC
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 300
comprenant des échantillons représentant différents stades de l’infection et différents profils d’anticorps.
Génotypes 1-4 du VHC: > 20 échantillons (y compris sous-types non-a du génotype 4); Génotype 5 du VHC: > 5 échantillons; Génotype 6 du VHC: en fonction des disponibilités
| Identification comme «positif confirmé» ou «indéterminé» et non comme «négatif»
| Panels de séroconversion | ≥ 15 panels de séroconversion/panels à faible titre | La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique
| Spécificité diagnostique | Donneurs de sang | ≥ 200 | Pas de résultats faussement positifs/pas de neutralisation
| Patients hospitalisés | ≥ 200
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle | ≥ 50 au total (y compris des échantillons de femmes enceintes, des échantillons ayant donné des résultats indéterminés dans d’autres tests de confirmation)
Tableau 4. Tests antigéniques: antigène VHC, Ag/Ac VHC (exigences pour la détection des antigènes)
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs | ≥ 25 échantillons positifs à l’antigène de capside du VHC et/ou à l’ARN du VHC mais négatifs à l’anti-VHC, comprenant les génotypes 1-6 du VHC (si l’on ne dispose pas d’un génotype, une justification doit être fournie) | Tous les échantillons vrais positifs doivent être identifiés comme positifs
| Panels de séroconversion |
≥ 20 panels de séroconversion/panels à faible titre
Les panels de séroconversion du VHC destinés à l’évaluation des tests combinés antigènes et anticorps du VHC doivent commencer par un ou plusieurs tests sanguins négatifs et comporter des membres relevant d’une infection précoce par le VHC (positifs à l’antigène de capside du VHC et/ou à l’ARN du VHC mais négatifs aux anti-VHC).
|
La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique
Les tests combinés antigènes et anticorps du VHC doivent démontrer une amélioration de la sensibilité à l’infection précoce par le VHC par rapport aux tests portant uniquement sur les anticorps dirigés contre le VHC.
| Sensibilité analytique | Standard international de l’OMS concernant la capside du VHC (PEI 129096/12) | Séries de dilution |
| Spécificité diagnostique | Donneurs de sang | ≥ 200 | ≥ 99,5 % après neutralisation ou, si aucun test de neutralisation n’est disponible, après résolution du statut de l’échantillon
| Patients hospitalisés | ≥ 200 | Les limitations potentielles quant à la spécificité doivent être identifiées le cas échéant
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle | ≥ 50
Tableau 5. Dispositifs NAT qualitatifs et quantitatifs pour l’ARN du VHC
1. En ce qui concerne les dispositifs d’amplification d’une séquence cible, un contrôle de fonctionnalité pour chaque échantillon (contrôle interne) représente l’état de la technique. Ce contrôle est opéré si possible tout au long du processus: extraction, amplification/hybridation, détection.
2. La détection du génotype et/ou du sous-type doit être démontrée par une validation appropriée de la conception de l’amorce ou de la sonde et doit aussi être validée en testant des échantillons de génotypes caractérisés.
3. La réaction croisée potentielle de séquences d’un acide nucléique non cible doit être analysée par une validation appropriée de la conception de l’amorce ou de la sonde et doit aussi être validée en testant des échantillons sélectionnés.
4. Les résultats des dispositifs NAT quantitatifs doivent suivre les normes internationales ou les matériaux de référence étalonnés, en fonction des disponibilités, et sont exprimés en unités internationales utilisées dans le domaine d’application en question.
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité analytique | Standard international de l’OMS concernant l’ARN du VHC (ou matériaux de référence étalonnés) |
La sensibilité et la limite de détection des tests NAT doivent être validées par des séries de dilution de matériaux de référence, en testant les réplicats (au minimum 24) à différentes concentrations d’analyte, y compris celles avec une transition de résultats positifs à des résultats négatifs avec le dispositif NAT en question.
La limite de détection doit être exprimée en tant que valeur limite positive à 95 % (IU/ml) après des analyses statistiques (par exemple, des analyses de probabilité).
NAT quantitatif: définition de limite de quantification inférieure et supérieure, fidélité, exactitude,
champ de mesure «linéaire», «champ dynamique».
Reproductibilité aux différents niveaux de concentration.
| Conformément à l’état de la technique
| Sensibilité des génotypes du VHC |
Tous les génotypes/sous-types en question, de préférence de matériaux de référence internationaux
Substituts potentiels pour génotypes rares de VHC (à quantifier par des méthodes appropriées): transcrits in vitro; plasmides
|
NAT qualitatif: ≥ 10 échantillons par génotype ou sous-type.
NAT quantitatif: séries de dilution pour démontrer l’efficacité de la quantification
| Conformément à l’état de la technique
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs reflétant les conditions de routine des utilisateurs (par exemple, pas de présélection des échantillons) |
NAT quantitatif: ≥ 100
Des résultats comparatifs avec un autre système NAT doivent être établis en parallèle.
| Conformément à l’état de la technique
| Panels de séroconversion |
NAT qualitatif: ≥ 10 panels
Des résultats comparatifs avec un autre système NAT doivent être établis en parallèle.
| Conformément à l’état de la technique
| Spécificité diagnostique | Échantillons de donneurs de sang |
NAT qualitatif: ≥ 500
NAT quantitatif: ≥ 100
| Conformément à l’état de la technique
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle | > 10 échantillons positifs pour un flavivirus humain (exemple: HGV, YFV) | Conformément à l’état de la technique
| Effets reportés |
Fortement positifs à l’ARN du VHC;
négatifs à l’ARN du VHC
| Au moins cinq séries doivent être réalisées lors des études de robustesse, en alternant des échantillons fortement positifs et négatifs. Les titres viraux des échantillons fortement positifs doivent être représentatifs des titres viraux élevés apparaissant naturellement. | Conformément à l’état de la technique
| Détection en lien avec le statut immunologique | Positifs à l’ARN du VHC: négatifs aux anti-VHC, positifs aux anti-VHC | Échantillons de préséroconversion (négatifs aux anti-VHC) et de post-séroconversion (positifs aux anti-VHC). | Conformément à l’état de la technique
| Taux d’échec global | Faiblement positifs à l’ARN du VHC | ≥ 100 échantillons faiblement positifs à l’ARN du VHC doivent être testés. Ceux-ci doivent contenir une concentration en virus équivalente à trois fois la concentration en virus limite positive à 95 %. | ≥ 99 % positifs
Tableau 6. Exigences supplémentaires applicables aux autotests VHC
| Caractéristique de performance | Échantillons | Nombre de profanes
| Interprétation des résultats |
Interprétation des résultats par des profanes reflétant le champ de niveaux de réactivité suivant:
— non réactifs
— réactifs
— faiblement réactifs
— non valables
| ≥ 100
| Sensibilité diagnostique | Personnes profanes dont on sait qu’elles sont positives | ≥ 200
| Spécificité diagnostique | Personnes profanes qui ignorent leur statut | ≥ 400
| Personnes profanes qui ont un risque élevé d’avoir contracté l’infection | ≥ 200