Champ d’application
La présente annexe s’applique aux dispositifs destinés à la détection ou à la quantification des marqueurs d’infection par le virus de l’hépatite B (VHB).
Le tableau 1 s’applique aux tests de première ligne pour l’antigène de surface du virus de l’hépatite B (AgHBs) et pour les anticorps dirigés contre l’antigène de capside du virus de l’hépatite B (anti-HBc) qui ne sont pas des tests rapides.
Le tableau 2 s’applique aux tests de première ligne AgHBs et anti-HBc qui sont des tests rapides.
Le tableau 3 s’applique aux tests de confirmation AgHBs.
Le tableau 4 s’applique aux tests de marqueurs d’infection par le virus de l’hépatite B: anticorps dirigés contre l’antigène de surface du virus de l’hépatite B (anti-HBs), anticorps IgM dirigés contre l’antigène de capside du virus de l’hépatite B (anti-HBc IgM), anticorps dirigés contre l’antigène Hbe (anti-HBe) et l’antigène Hbe (AgHBe).
Le tableau 5 s’applique aux dispositifs NAT qualitatifs et quantitatifs pour l’acide désoxyribonucléique (ADN) du VHB.
Le tableau 6 s’applique aux autotests VHB.
Tableau 1. Tests de première ligne: AgHBs, anti-HBc
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 400
Anti-HBc: y compris évaluation d’autres marqueurs VHB
AgHBs: comprenant différents génotypes/sous-types/mutants du VHB
Anti-HBc ou AgHBs: y compris 25 échantillons positifs de sérum frais «du jour même» (≤ 1 jour après le prélèvement)
| Les performances globales doivent être au moins équivalentes à celles du dispositif comparateur
| Panels de séroconversion |
Tests AgHBs:
≥ 30 panels
Tests anti-HBc:
à définir en fonction des disponibilités
| La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique (pour les anti-HBc, cela doit être le cas, si possible)
| Sensibilité analytique | Troisième standard international de l’OMS concernant l’AgHBs, (sous-types ayw1/adw2, VHB génotype B4, code NIBSC: 12/226) | | Pour les tests AgHBs: < 0,130 UI/ml
| Spécificité diagnostique | Donneurs de sang non sélectionnés (y compris donneurs effectuant leur premier don) | ≥ 5 000 | ≥ 99,5 %
| Patients hospitalisés | ≥ 200 | Les limitations potentielles quant à la spécificité doivent être identifiées le cas échéant
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle |
≥ 100 au total
(par exemple, RF+, d’infections virales apparentées, de femmes enceintes)
Tableau 2. Tests rapides: AgHBs, anti-HBc
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 400
y compris évaluation d’autres marqueurs VHB
comprenant différents génotypes/sous-types/mutants du VHB
| Les performances globales doivent être au moins équivalentes à celles du dispositif comparateur
| Panels de séroconversion |
Tests AgHBs:
≥ 30 panels
Tests anti-HBc:
à définir en fonction des disponibilités
| La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique (pour les anti-HBc, cela doit être le cas, si possible)
| Spécificité diagnostique | Donneurs de sang non sélectionnés (y compris donneurs effectuant leur premier don) | ≥ 1 000 |
Tests AgHBs: ≥ 99 %
Tests anti-HBc: ≥ 99 %
| Patients hospitalisés | ≥ 200 | Les limitations potentielles quant à la spécificité doivent être identifiées le cas échéant
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle |
≥ 200 échantillons de femmes enceintes
≥ 100 autres échantillons avec réaction croisée potentielle au total (par exemple, FR+, d’infections apparentées)
Tableau 3. Tests de confirmation: AgHBs
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 300
Comprenant des échantillons représentant différents stades de l’infection
Comprenant 20 échantillons «fortement positifs» (> 26 UI/ml); 20 échantillons proches de la valeur limite
| Identification correcte comme positif (ou indéterminé) et non comme négatif
| Panels de séroconversion | ≥ 15 panels de séroconversion/panels à faible titre | La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique
| Sensibilité analytique | Troisième standard international de l’OMS concernant l’AgHBs, sous-types ayw1/adw2, VHB génotype B4, code NIBSC: 12/226 | |
| Spécificité diagnostique | Échantillons négatifs | ≥ 10 faux positifs si disponibles à l’issue de l’évaluation des performances du test de première ligne | Pas de résultats faussement positifs/pas de neutralisation
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle | ≥ 50
Tableau 4. Tests de marqueurs VHB: anti-HBs, anti-HBc IgM, anti-HBe, AgHBe
| Caractéristique de performance | | anti-HBs: | anti-HBc IgM | anti-HBe | AgHBe | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 100 sujets vaccinés
≥ 100 sujets naturellement infectés
|
≥ 200
Comprenant des échantillons à différents stades de l’infection (aigu/chronique, etc.)
|
≥ 200
Comprenant des échantillons à différents stades de l’infection (aigu/chronique, etc.)
|
≥ 200
Comprenant des échantillons à différents stades de l’infection (aigu/chronique, etc.)
|
≥ 98 %
(pour anti-HBc IgM: les critères d’acceptation ne doivent s’appliquer qu’à des échantillons à un stade d’infection aigu)
| Panels de séroconversion | 10 panneaux de séroconversion anti-HB ou série de suivi | En fonction des disponibilités | En fonction des disponibilités | En fonction des disponibilités | La sensibilité diagnostique lors de la séroconversion doit représenter l’état de la technique (pour anti-HBc IgM, anti-HBe, AgHBe, cela doit être le cas, si possible)
| Sensibilité analytique | Normes | Deuxième standard international de l’OMS concernant l’immunoglobuline humaine de l’antigène de surface de l’hépatite B (anti-HBs), code NIBSC: 07/164 | | Premier standard international de l’OMS concernant l’antigène e du virus de l’hépatite B (anti-HBe), code PEI 129095/12 | Premier standard international de l’OMS concernant l’antigène e du virus de l’hépatite B (AgHBe) code PEI 129097/12 HBe | anti-HBs: < 10 mUI/ml
| Spécificité diagnostique | Échantillons négatifs |
≥ 500
Comprenant des échantillons cliniques
≥ 50 échantillons potentiellement interférents
|
≥ 200 dons de sang
≥ 200 échantillons cliniques
≥ 50 échantillons potentiellement interférents
|
≥ 200 dons de sang
≥ 200 échantillons cliniques
≥ 50 échantillons potentiellement interférents
|
≥ 200 dons de sang
≥ 200 échantillons cliniques
≥ 50 échantillons potentiellement interférents
| ≥ 98 %
Tableau 5. Dispositifs NAT qualitatifs et quantitatifs pour l’ADN du VHB
1. En ce qui concerne les dispositifs d’amplification d’une séquence cible, un contrôle de fonctionnalité pour chaque échantillon (contrôle interne) représente l’état de la technique. Ce contrôle est opéré si possible tout au long du processus: extraction, amplification/hybridation, détection.
2. La détection du génotype et/ou du sous-type doit être démontrée par une validation appropriée de la conception de l’amorce ou de la sonde et doit aussi être validée en testant des échantillons de génotypes caractérisés.
3. La réaction croisée potentielle de séquences d’un acide nucléique non cible doit être analysée par une validation appropriée de la conception de l’amorce ou de la sonde et doit aussi être validée en testant des échantillons sélectionnés.
4. Les résultats des dispositifs NAT quantitatifs doivent suivre les normes internationales ou les matériaux de référence étalonnés, en fonction des disponibilités, et sont exprimés en unités internationales utilisées dans le domaine d’application en question.
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité analytique | Standard international de l’OMS concernant l’ADN du VHB (ou matériaux de référence étalonnés) |
La sensibilité et la limite de détection des tests NAT doivent être validées par des séries de dilution de matériaux de référence, en testant les réplicats (au minimum 24) à différentes concentrations d’analyte, y compris celles avec une transition de résultats positifs à des résultats négatifs avec le dispositif NAT en question.
La limite de détection doit être exprimée en tant que valeur limite positive à 95 % (IU/ml) après des analyses statistiques (par exemple, des analyses de probabilité).
NAT quantitatif: définition de limite de quantification inférieure et supérieure, fidélité, exactitude,
champ de mesure «linéaire», «champ dynamique». Reproductibilité aux différents niveaux de concentration.
| Conformément à l’état de la technique
| Sensibilité des génotypes du VHB |
Panel de référence international de l’OMS concernant l’ADN du VHB (génotypes du VHB)
Tous les génotypes/sous-types en question, de préférence de matériaux de référence internationaux
Substituts potentiels pour génotypes rares de VHB (à quantifier par des méthodes appropriées): plasmides; ADN synthétique
|
NAT qualitatif: au moins 10 échantillons par génotype ou sous-type
NAT quantitatif: séries de dilution pour démontrer l’efficacité de la quantification
| Conformément à l’état de la technique
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs reflétant les conditions de routine des utilisateurs (pas de présélection des échantillons) |
NAT quantitatif: ≥ 100
Des résultats comparatifs avec un autre système NAT doivent être établis en parallèle.
| Conformément à l’état de la technique
| Panels de séroconversion |
NAT qualitatif: ≥ 10 panels
Des résultats comparatifs avec un autre système NAT doivent être établis en parallèle.
| Conformément à l’état de la technique
| Spécificité diagnostique | Échantillons de donneurs de sang |
NAT qualitatif: ≥ 500
NAT quantitatif: ≥ 100
| Conformément à l’état de la technique
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle | | Conformément à l’état de la technique
| Effets reportés |
Fortement positifs à l’ADN du VHB;
négatifs à l’ADN du VHB
| Au moins cinq séries doivent être réalisées lors des études de robustesse, en alternant des échantillons fortement positifs et négatifs. Les titres viraux des échantillons fortement positifs doivent être représentatifs des titres viraux élevés apparaissant naturellement. | Conformément à l’état de la technique
| Détection en lien avec le statut immunologique | Positifs à l’ADN du VHB: négatifs à l’anti-VHB, positifs à l’anti-VHB | Échantillons de préséroconversion (négatifs à l’anti-VHB) et de post-séroconversion (positifs à l’anti-VHB). | Conformément à l’état de la technique
| Taux d’échec global | Faiblement positifs à l’ADN du VHB | ≥ 100 échantillons faiblement positifs à l’ADN du VHB doivent être testés. Ceux-ci doivent contenir une concentration en virus équivalente à trois fois la concentration en virus limite positive à 95 %. | ≥ 99 % positifs
Tableau 6. Exigences supplémentaires applicables aux autotests VHB
| Caractéristique de performance | Échantillons | Nombre de profanes
| Interprétation des résultats |
Interprétation des résultats par des profanes reflétant le champ de niveaux de réactivité suivant:
— non réactifs
— réactifs
— faiblement réactifs
— non valables
| ≥ 100
| Sensibilité diagnostique | Personnes profanes dont on sait qu’elles sont positives | ≥ 200
| Spécificité diagnostique | Personnes profanes qui ignorent leur statut | ≥ 400
| Personnes profanes qui ont un risque élevé d’avoir contracté l’infection | ≥ 200