Champ d’application
La présente annexe s’applique aux dispositifs destinés à la détection ou à la quantification des marqueurs d’infection par le virus de l’hépatite D (VHD).
Le tableau 1 s’applique aux dispositifs destinés à la détection (y compris la confirmation) ou à la quantification des marqueurs d’infection par le virus de l’hépatite D suivants: anticorps dirigés contre le virus de l’hépatite D (anti-VHD), anticorps IgM dirigés contre le virus de l’hépatite D (anti-VHD IgM), antigène Delta.
Le tableau 2 s’applique aux dispositifs NAT qualitatifs et quantitatifs pour l’ARN du VHC.
Tableau 1. Tests de marqueurs VHD: anti-VHD, anti-VHD IgM, antigène Delta
| Caractéristique de performance | | anti-VHD | anti-VHD IgM | Antigène Delta | Critères d’acceptation
| Sensibilité diagnostique | Échantillons positifs |
≥ 100
Indication des marqueurs de coïnfection de VHB
|
≥ 50
Indication des marqueurs de coïnfection de VHB
|
≥ 10
Indication des marqueurs de coïnfection de VHB
| ≥ 98 %
| Spécificité diagnostique | Échantillons négatifs |
≥ 200
Comprenant des échantillons cliniques
≥ 50 échantillons potentiellement interférents
|
≥ 200
Comprenant des échantillons cliniques
≥ 50 échantillons potentiellement interférents
|
≥ 200
Comprenant des échantillons cliniques
≥ 50 échantillons potentiellement interférents
| ≥ 98 %
Tableau 2. Dispositifs NAT qualitatifs et quantitatifs pour l’ARN du VHD
1. En ce qui concerne les dispositifs d’amplification d’une séquence cible, un contrôle de fonctionnalité pour chaque échantillon (contrôle interne) représente l’état de la technique. Ce contrôle est opéré si possible tout au long du processus: extraction, amplification/hybridation, détection.
2. La détection du génotype et/ou du sous-type doit être démontrée par une validation appropriée de la conception de l’amorce ou de la sonde et doit aussi être validée en testant des échantillons de génotypes caractérisés.
3. La réaction croisée potentielle de séquences d’un acide nucléique non cible doit être analysée par une validation appropriée de la conception de l’amorce ou de la sonde et doit aussi être validée en testant des échantillons sélectionnés.
4. Les résultats des dispositifs NAT quantitatifs doivent suivre les normes internationales ou les matériaux de référence étalonnés, en fonction des disponibilités, et sont exprimés en unités internationales utilisées dans le domaine d’application en question.
| Caractéristique de performance | Échantillon | Nombre d’échantillons, caractéristiques, utilisation | Critères d’acceptation
| Sensibilité analytique | Premier standard international de l’OMS concernant l’ARN du VHD, code PEI 7657/12 |
La sensibilité et la limite de détection des tests NAT doivent être validées par des séries de dilution de matériaux de référence, en testant les réplicats (au minimum 24) à différentes concentrations d’analyte, y compris celles avec une transition de résultats positifs à des résultats négatifs avec le dispositif NAT en question.
La limite de détection doit être exprimée en tant que valeur limite positive à 95 % (IU/ml) après des analyses statistiques (par exemple, des analyses de probabilité).
NAT quantitatif: définition de limite de quantification inférieure et supérieure, fidélité, exactitude,
champ de mesure «linéaire», «champ dynamique». Reproductibilité aux différents niveaux de concentration.
| Conformément à l’état de la technique
| Sensibilité des génotypes du VHD |
Tous les génotypes/sous-types en question, de préférence de matériaux de référence internationaux
Substituts potentiels pour génotypes rares de VHD (à quantifier par des méthodes appropriées): plasmides; ARN synthétique
| NAT quantitatif: séries de dilution pour démontrer l’efficacité de la quantification | Conformément à l’état de la technique
| Spécificité diagnostique | Échantillons de donneurs de sang |
NAT qualitatif: ≥ 100
NAT quantitatif: ≥ 100
| Conformément à l’état de la technique
| Réactivité croisée | Échantillons avec réaction croisée potentielle | | Conformément à l’état de la technique
| Effets reportés |
Fortement positifs à l’ARN du VHD;
négatifs à l’ARN du VHD
| Au moins cinq séries doivent être réalisées lors des études de robustesse, en alternant des échantillons fortement positifs et négatifs. Les titres viraux des échantillons fortement positifs doivent être représentatifs des titres viraux élevés apparaissant naturellement. | Conformément à l’état de la technique
| Taux d’échec global | Faiblement positifs à l’ARN du VHD | ≥ 100 échantillons faiblement positifs à l’ARN du VHD doivent être testés. Ceux-ci doivent contenir une concentration en virus équivalente à trois fois la concentration en virus limite positive à 95 %. | ≥ 99 % positifs